Zygotes

Description des zygotes stade 2 pronuclei (PN)

La cinétique de formation PN peut être suivie par microphotographie en accéléré (time-lapse).

 Centrage des PN

Les PN sont généralement situés au centre ou à proximité du centre du zygote, mais ils peuvent être à la périphérie dans certains cas.

 

Proximité des PN

Après sa formation, le PN féminin se déplace vers le PN mâle jusqu’à ce que les deux se trouvent à proximité. Les 2 PN peuvent apparaître en butée, en contact ou encore séparés dans certains zygotes.

Orientation des PN

 Les PN tournent de concert dans le cytoplasme pour s’aligner avec le deuxième globule polaire. Selon le moment de l’observation, on peut donc les voir à divers stades.

Corpuscules précurseurs nucléolaires – Nucleolar precursor bodies (NPB)

 Nombre de NPB

Le nombre total de NPB peut varier de plus de 14 à moins de 6. Une coalescence progressive de NPB est probablement responsable d’une diminution du nombre NPB combinée à une augmentation de leur taille.

 

Asymétrie du nombre de NPB

L’asymétrie dans le nombre de NPB entre le 2 PN est observée dans la plupart des zygotes et reflète probablement différents modes de développement entre le mâle et femelle PN. Cette asymétrie peut cependant être limitée ou très importante.

 

Polarisation des NPB

Les NPB ont tendance à polariser vers la frontière séparant le 2 PN. Cette polarisation peut être très forte, intermédiaire ou totalement absente. Elle peut évoluer différemment dans les deux pronuclei.

 

Halo cytoplasmique

Les organelles cytoplasmiques, probablement les mitochondries, se déplacent vers le centre du zygote, résultant en un halo clair à sa périphérie. La taille du halo varier selon les zygotes. Il peut être absent dans certains zygotes.

 

 

Paramètres du test EQC

Le test EQConline propose plusieurs réponses pour les différentes caractéristiques d'un zygote 2 pronucléaire. Vous ne pouvez faire qu'un seul choix.
Bien que vous ne puissiez pas être habitué à classer les zygotes dans vos activités quotidiennes, le classement est un moyen pratique de communiquer les caractéristiques des zygotes aux collègues et au personnel médical. À notre avis, il s'agit d'un paramètre important à surveiller dans un système de contrôle de la qualité externe.

Position des PN

La position des pronuclei (PN) change avec le temps. Ils apparaissent généralement à la périphérie où le spermatozoïde est entré dans l'ovocyte. L'aster créé par le centriole du sperme va rapprocher les pronucléus féminin et masculin et les deux migreront ensemble vers le centre de l'ovocyte, où se dérouleront les événements conduisant à la première division mitotique.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
Périphérie	Clairement situés en périphérie près de l'oolemme
Intermediaire	En position intermédiaire, mais non centrée
Centrée	Au centre de l'ovocyte

 

Proximité des PN

Le pronucleus mâle provient de la tête du spermatozoïde, tandis que le pronucleus femelle apparaît après la deuxième division méiotique. Ils contiennent respectivement les chromosomes mâles et femelles. Ces deux organelles sont réunies par l'aster provenant du centriole du spermatozoïde. Les deux pronuclei peuvent ainsi apparaître séparés, proches ou aboutés en fonction du moment où le zygote est observé. Il faut garder à l'esprit qu'il s'agit d'un processus dynamique, qui ne représente pas une caractéristique stable du zygote.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
Séparés	les deux PN sont séparés par un peu de matériel cytoplasmique
Proches	les deux PN sont en contact étroit mais n'ont pas encore construit de frontière commune. Selon l'orientation de l'ovocyte, cette étape peut être prise par erreur pour les deux autres
Joints	les deux PN ont établi une frontière commune et ont perdu leur forme sphérique

 

Taille des PN

Le pronucleus mâle (celui situé le plus éloigné des corps polaires) peut apparaître légèrement plus grand. Dans la plupart des cas, cette différence est à peine visible et les deux pronucléus présentent des tailles similaires.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
Très inégales	les deux PN présentent des tailles nettement différentes
Légèrement inégales	les deux PN présentent des tailles légèrement différentes
Egales	les deux PN présentent des tailles comparables

 

Nombre de NPB

Les corps précurseurs nucléolaires (NPB) sont des structures intranucléaires qui conduiront à la formation de nucléoles. Leur nombre et leur taille varient d'une espèce à l'autre et chez l'homme du zygote au zygote. Ils sont corrélés avec l'activité de synthèse de l'ARN précoce. Trois classes ont été considérées ici (<6, 6-14,> 14).

 

Paramètres	Aspects morphologiques
<6	1-5 NPB comptés dans les deux PN
6-14	6-14 NPB comptés dans les deux PN
>14	plus de 14 NPB comptés dans les deux PN

Symmétrie des NPB

Le nombre de corps précurseurs nucléolaires (NPB) peut ne pas être identique dans les deux PN. Trois situations sont considérées ici, où le nombre de NPB peut être égal, différent de moins ou de plus de 3 unités.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
∂≤3	les nombres de NBP dans les deux PN diffèrent de 3 unités ou moins
∂>3	les nombres de NBP dans les deux PN diffèrent de plus de 3 unités
Symmétrique	on trouve le même nombre de NPB dans les deux PN

 

Polarisation des NPB

Les corps précurseurs nucléolaires peuvent être répartis uniformément dans tout le PN ou peuvent avoir tendance à se concentrer le long de la frontière commune entre les deux PN. Trois situations sont considérées ici.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
Non polarisé	les NPB sont distribués uniformément
Polarisé	les NPB sont allignés le long d'une frontière commune
Intermédiaire	les NBP ne sont pas distribués uniformément, mais tendent clairement à se concentrer uniformément ou inégalement près de la frontière commune

 

Halo cytoplasmique

Après la fécondation, le cytoplasme peut se rétracter à la suite de la migration des organelles vers les deux PN. Cela conduit à la formation d'une zone claire à la périphérie du zygote, connue sous le nom de halo cytoplasmique. L'étendue de ce halo peut être grande, petite ou inexistante.

 

Paramètres	Aspects morphologiques
Absent	aucun halo visible
Faible	un faible halo est visible
Important	un grand halo cytoplasmique nettement visible apparaît sur plus d'un quart de la circonférence

Effets des phénotypes du zygote sur le développement et l'implantation de l'embryon

 

Paramètres	Effet sur l'implantation
PN centrage	Préjudiciable si périphérique
PN proximité	Préjudiciable si distant
PN orientation	Controversé
NPB polarisation	Benefique si important
NPB asymmétrie	Préjudiciable si important (NPB>3)
Halo cytoplasmique	Benefique

Bibliographie

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• Scott L. Pronuclear scoring as a predictor of embryo development. RBMonline 6: 201-214, 2003.
• Tesarik J and Greco E. The probability of abnormal preimplantation development can be predicted by a single static observation on pronuclear stage morphology. Human Reprod 14: 1318-1323, 1999.