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Zigoti

Descrizione degli zigoti di fase 2-PN

La cinetica della formazione PN può essere seguita da microfotografia time-lapse. Un piccolo film può essere visto qui.

Centraggio PN

Le PN si trovano di solito in prossimità del centro dello zigote ma possono essere periferiche in alcuni zigoti.

EX_PN_POSITION.jpg

 

Prossimità PN

Dopo la loro formazione, la PN femmina si sposta verso la PN maschile fino a quando non si trovano nelle immediate vicinanze. La 2 PN può apparire appoggiata, in contatto o ancora separata in alcuni zigoti.

EX_PN_PROXIMITY.jpgOrientamento PN

La PN dispersa ruota nel citoplasma e il loro asse può apparire allineato con il secondo corpo polare o disallineato in una certa misura.

EX_PN_ORIENTATION.jpgCorpi precursori nucleiolari (NPB)

NUMERO NPB

Il numero totale di NPB può variare da più di 14 a meno di 6. Una coalescenza progressiva di NPB è probabilmente responsabile di una diminuzione del numero di NPB combinata con un aumento delle loro dimensioni.

EX_NPB_NB.jpg

 

NUMERO DI NPB ASIMMETRIA

L'asimmetria nel numero NPB tra i 2 PN è osservata nella maggior parte degli zigoti e probabilmente riflette diversi modelli di sviluppo tra la PN maschile e femminile. Questa asimmetria può essere tuttavia limitata o molto importante.

EX_NPB_SYM.jpg

 

POLARIZZAZIONE NPB

L'NPB tende a polarizzarsi verso la linea che separa la 2 PN. Questa polarizzazione può essere molto forte, intermedia o totalmente assente. Potrebbe progredire in modo diverso nei due pronuclei.

EX_NPB_POL.jpg

 

Alone citoplasmatico

Gli organelli citoplasmatici, probabilmente i mitocondri, si muovono verso il centro dello zigote attorno al 2PN, risultando in un alone chiaro alla periferia dello zigote. La dimensione dell'alone varia in base agli zigoti. Potrebbe essere assente in alcuni zigoti.

EX_HALO.jpg

 

Parametri del test EQC

Il test EQConline ti fornirà diverse possibili risposte per le varie caratteristiche di uno zigote pronucleare 2. Puoi fare solo una scelta.
Anche se non puoi essere utilizzato per classificare gli zigoti nell'attività quotidiana, la valutazione è un modo conveniente per comunicare le caratteristiche dello zigote sia ai colleghi che al personale medico. A nostro avviso, si tratta di un parametro importante da monitorare in uno schema di controllo di qualità esterno.

Posizione PN

La posizione dei pronuclei (PN) cambia nel tempo. Sembrano di solito alla periferia dove lo spermatozoo è entrato nell'oocita. L'aster creato dai centrioli spermatici porterà i pronuclei femmina e maschio insieme e i due migreranno insieme verso il centro dell'ovocita, dove si svolgeranno gli eventi che porteranno alla prima divisione mitotica.

 

Parametri Aspetti morfologici
Periferia chiaramente situato vicino all'ooplasma
Intermedio non più nella periferia, ma ancora non al centro
Centrato nel mezzo della cella

Prossimità PN

Il pronucleo maschile ha origine dalla testa dello spermatozoo, mentre il pronucleo femminile compare dopo la seconda divisione meiotica. Contengono rispettivamente i cromosomi maschili e femminili. Questi due organelli sono riuniti dall'asterio proveniente dai centriolo dello sperma. I due pronuclei possono quindi apparire separati, vicini o sostenuti a seconda di quale momento si osserva lo zigote. Si dovrebbe tenere presente che questo è un processo dinamico, che non rappresenta una caratteristica stabile dello zigote.

Parametri Aspetto morfologico
Separato le due PN sono separate da un materiale citoplasmatico
Vicino le due PN sono commoventi, ma non hanno ancora costruito una frontiera comune. A seconda dell'orientamento dell'ovocita, questa fase può essere scambiata per gli altri due
Confinava

le due PN hanno creato una frontiera comune e hanno perso il loro aspetto sferico

Dimensioni PN

Il pronucleo maschile (quello situato più distante dai corpi polari) può apparire leggermente più grande. Nella maggior parte dei casi, questa differenza è appena visibile e le due pronuclei mostrano dimensioni simili.

 

Parametri Aspetto morfologico
Fortemente ineguale le due PN mostrano dimensioni chiaramente differenti
Un po 'impari le dimensioni delle due PN sono leggermente diverse
Pari le due PN sono di dimensioni comparabili

Numero NPB

I corpi precursori nucleolari (NPB) sono strutture intranucleari che porteranno alla formazione di nucleoli. Il loro numero e le loro dimensioni variano da specie a specie e nell'uomo da zigote a zigote. Sono correlati con l'attività di sintesi dell'RNA precoce. Qui sono state considerate tre classi (<6, 6-14,> 14).

 

Parametri Aspetto morfologico
<6 1-5 NPB contati nelle due PN
6-14 6-14 NPB contati nelle due PN
>14 più di 14 NPB contati nelle due PN

Simmetria NPB

Il numero di corpi precursori nucleolari (NPB) potrebbe non essere identico nelle due PN. Qui vengono considerate tre situazioni, in cui il numero di NPB può essere uguale, diverso da meno o più di 3 unità.

 

Parameters Morphological aspect
∂≤3 i numeri NBP nei due PN differiscono di 3 o meno
∂>3 i numeri NBP nei due PN differiscono di più di 3
Simmetrico lo stesso numero di NPB si trova nelle due PN

Polarizzazione NPB

I corpi precursori nucleolari possono essere equamente distribuiti in tutta la PN o possono tendere a concentrarsi lungo il confine comune tra le due PN. Tre situazioni sono considerate qui.

 

Parametri Aspetto morfologico
Non polarizzato le NPB sono equamente distribuite
Polarized gli NPB sono allineati lungo il confine comune
Intermedio le NBP non sono distribuite uniformemente, ma tendono chiaramente a concentrarsi uniformemente o in modo non uniforme vicino al confine comune

Alone citoplasmatico

Dopo la fecondazione, il citoplasma può ritrarsi come risultato della migrazione degli organelli verso le due PN. Ciò porta alla formazione di una zona limpida alla periferia dello zigote, conosciuta come l'alone del citoplasma. L'estensione di questo alone può essere grande, piccola o inesistente.

 

Parametri Aspetto morfologico
Nessuna nessun alone citoplasmatico è visibile
Piccolo un piccolo alone citoplasmatico è visibile vicino al oolemma
Grande un alone citoplasmatico ampio e chiaramente visibile appare su più di un quarto della circonferenza

Effetti dei fenotipi dello zigote sullo sviluppo e sull'impianto dell'embrione

 

Parametri Effetto sull'impianto
Centraggio PN Dimenticale se periferico
Prossimità PN Dimenticale se distante
Orientamento PN Controverso
Polarizzazione NPB Benefico se forte
Asimmetria NPB Dimenticale se importante (NPB> 3)
Alone citoplasmatico Benefico

Riferimenti

  • Ebner T et al. Selection based on morphological assessment of oocytes and embryos at different stages of preimplantation development: a review. Human Reprod Update 9: 251-262, 2003.
  • Garello et al. Pronuclear orientation, polar body placement, and embryo quality after intracytoplasmic sperm injection and in-vitro fertilization: further evidence for polarity in human oocytes? Human Reprod 14: 2588-2595, 1999.
  • Senn A et al. Morphological scoring of human pronuclear zygotes for prediction of pregnancy outcome. Human Reprod 21: 234-239, 2006.
  • Scott L. Pronuclear scoring as a predictor of embryo development. RBMonline 6: 201-214, 2003.
  • Tesarik J and Greco E. The probability of abnormal preimplantation development can be predicted by a single static observation on pronuclear stage morphology. Human Reprod 14: 1318-1323, 1999.